英文名稱:RatTRAP Assay Kit
【使用目的】
RatTRAPTM test是一種用來測定大鼠血樣中來源于破骨細胞的抗酒石酸性磷酸酶5b(TRAP5b)的固相酶聯(lián)免疫活性測定。
RatTRAPTM test只供科研使用。
【概要說明】
TRAP是破骨細胞骨吸收中表達并被釋放進入血循環(huán)。因此,血清TRAP被認為是有效測定骨吸收速率的潛在標記物。然而,一些問題阻止了特異性TRAP分析的發(fā)展,包括血清中一些其它酸性磷酸酶,兩種TRACP的異構重組產物——5a和5b,活躍或不活躍的TRAP分子及循環(huán)中一些碎片的干擾。
RatTRAP™分析方法是一個特異性檢測大鼠破骨細胞分泌到循環(huán)中的TRAP 5b。并且,RatTRAP™只檢測剛進入循環(huán)之內有活性的TRAP分子。該方法不會檢測到在循環(huán)中沒有活性的TRAP分子或碎片。因此,RatTRAP™分析方法能準確評估在樣本采集時的骨吸收速率的數(shù)量。
【應用】
RatTRAP™分析能用于監(jiān)測睪丸切除術和卵巢切除術后大鼠模型的骨吸收速率的改變。然而,該分析方法的使用存在著一些限制。我們推薦在手術操作前提取血清樣本(日子0,基準樣本,非常重要),在手術操作后的1,2,4,7 和 14 天提取血清樣本。在每個時間點都必須包括一個假設群體作為正常水平組。我們的結果出示血清TRAP 5b水平在睪丸切除術和卵巢切除術之后的幾天內快速上升, 然后在手術后2個星期又回重到正常的水平。在那個時間點之后,TRAP 5b水平不再高于正常值。
【原理】
RatTRAP™使用一個高特異性的單克隆抗體是以重組巴氏病毒激發(fā)的RatTRAP作為抗原產生的。在測試中,抗體在包被有抗鼠IgG的單克隆抗體微量孔中孵育。洗滌之后,標準品,質控品和血清樣本在微量孔孵育,并且測定TRAP 5b活性是在TRAP 5a失活而TRAP 5b高活性時的PH下,利用發(fā)光底物酶顯色。反應被終止,反應混合物的吸光度在微量板讀數(shù)儀上讀取,顏色的亮度與樣本中TRACP 5b的活性和數(shù)量成正比。