英文名稱：Calprotectin ELISA KIT（stool）
【預(yù)期用途】
本產(chǎn)品僅供科研使用。糞便鈣衛(wèi)蛋白酶聯(lián)免疫吸附分析試劑盒用于定量測(cè)定人糞便中鈣衛(wèi)蛋白（MRP 8/14）的含量。
【概要說(shuō)明】
鈣衛(wèi)蛋白又叫MRP8/14，L1，(p8,14)，p34。
構(gòu)成鈣衛(wèi)蛋白異聚體的兩種蛋白名稱：
S
S
鈣衛(wèi)蛋白是一種鈣結(jié)合蛋白，主要由嗜中性粒細(xì)胞和單核細(xì)胞分泌。糞便中的鈣衛(wèi)蛋白是腫瘤性和炎癥性腸胃疾病的標(biāo)志物。
由于很難區(qū)分腸易激綜合征和慢性腸炎疾病，因此要經(jīng)常對(duì)病人進(jìn)行結(jié)腸窺鏡檢查。而鈣衛(wèi)蛋白檢測(cè)能夠很好區(qū)分這兩種疾病。糞便中鈣衛(wèi)蛋白水平與克羅恩病和潰瘍性結(jié)腸炎的組織學(xué)、內(nèi)窺鏡檢查具有顯著一致性，也和腸炎疾病的檢測(cè)金標(biāo)準(zhǔn)——糞便中銦-111標(biāo)記的嗜中性粒細(xì)胞分泌物具有極高相關(guān)性。由于檢測(cè)銦-111標(biāo)記的嗜中性粒細(xì)胞的成本較高（住院治療、同位素分析和處理）且病人暴露于放射性環(huán)境下，不建議對(duì)兒童和孕婦采用該方法。
鈣衛(wèi)蛋白水平提高預(yù)示著相應(yīng)疾病的復(fù)發(fā)，是一個(gè)比CRP,ESR,HB更好的標(biāo)志物。將上述標(biāo)志物與結(jié)腸直腸癌的標(biāo)準(zhǔn)便潛血檢測(cè)比較后發(fā)現(xiàn)，糞便中鈣衛(wèi)蛋白檢測(cè)在診斷上更具優(yōu)勢(shì)：如果糞便中鈣衛(wèi)蛋白水平很低，極大程度上說(shuō)明未患有器官性腸道疾病。
檢測(cè)糞便中鈣衛(wèi)蛋白水平有助于：
l 急性炎癥的標(biāo)志物
l 評(píng)估腸胃炎癥程度
l 監(jiān)測(cè)克羅恩病、潰瘍性結(jié)腸炎或息肉摘除后病人狀況
進(jìn)行糞便檢查時(shí)區(qū)分腸炎疾�。ǹ肆_恩病、潰瘍性結(jié)腸炎）和腸易激綜合癥。
【樣本要求】
1．采用糞便樣本。
盡管糞便中的鈣衛(wèi)蛋白保持穩(wěn)定約6天，仍然建議將糞便樣本于2-8°C下保存且不超過(guò)48小時(shí)。-20°C下可長(zhǎng)期保存。允許將樣本緩慢解凍（于2-8°C下過(guò)夜），分析前平衡至室溫。
2．樣本提取
1）建議使用糞便樣本提取試劑盒，取100 mg糞便樣本溶于5ml提取緩沖液中。
緩沖液體積恒量：5ml
稀釋因子：1：50
2）或選擇人工方法，稱重80-120mg糞便樣本，記下確切重量。
a. 向樣本加入5ml緩沖液。
緩沖液體積恒量：5ml
稀釋因子取決于樣本量，使用多少樣本量應(yīng)考慮后面的計(jì)算。請(qǐng)參考下表中正確的稀釋因子：
|
重量（mg） |
稀釋因子 |
重量（mg） |
稀釋因子 |
|
80 |
62.5 |
102 |
49.0 |
|
82 |
60.9 |
104 |
48.1 |
|
84 |
59.5 |
106 |
47.2 |
|
86 |
58.1 |
108 |
46.3 |
|
88 |
56.8 |
110 |
45.5 |
|
90 |
55.6 |
112 |
44.6 |
|
92 |
54.3 |
114 |
43.9 |
|
94 |
53.2 |
116 |
43.1 |
|
96 |
52.1 |
118 |
42.4 |
|
98 |
51.0 |
120 |
41.6 |
|
100 |
50 |
|
|
b. 每個(gè)樣本所需緩沖液體積取決于樣本量（見(jiàn)下表）。稀釋因子保持1：50不變。
因此，對(duì)于所有樣本來(lái)說(shuō)，相同的稀釋因子可應(yīng)用于后面的結(jié)果評(píng)估。
|
重量（mg） |
緩沖液體積（ml） |
重量（mg） |
緩沖液體積（ml） |
|
80 |
4.0 |
102 |
5.1 |
|
82 |
4.1 |
104 |
5.2 |
|
84 |
4.2 |
106 |
5.3 |
|
86 |
4.3 |
108 |
5.4 |
|
88 |
4.4 |
110 |
5.5 |
|
90 |
4.5 |
112 |
5.6 |
|
92 |
4.6 |
114 |
5.7 |
|
94 |
4.7 |
116 |
5.8 |
|
96 |
4.8 |
118 |
5.9 |
|
98 |
4.9 |
120 |
6.0 |
|
100 |
5.0 |
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混合糞便樣本和緩沖液，于渦旋混合器上振蕩至少30秒（取決于糞便硬度）。
移取1ml糞便懸浮液到EP管內(nèi)，13000g條件下離心5分鐘。
3．樣本稀釋
取樣本提取上清液，用沖洗緩沖液以1：50比例稀釋。例如：20ml上清液（稀釋1）+980ml沖洗液=1：50（稀釋2）。移取100ml稀釋2的上清液用于檢測(cè)分析。
(Poullis
A et al. (2002) Aliment Pharmacol Thr 16:675-681)
【參考文獻(xiàn)】
1. Poullis A et al. (2002) Aliment
Pharmacol Thr 16:675-681
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3. Tibble et al. (2000) Gut 47:506-513
4. Tibble et al. (2000) Gastro 119:15-22