使用
本產(chǎn)品僅供科研使用，主要用于檢測(cè)人成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子23在血清、血漿或細(xì)胞培養(yǎng)基中的水平。
簡(jiǎn)介
成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子23（FGF-23）是最近發(fā)現(xiàn)的相關(guān)蛋白大家族中的新成員。其基因編碼為一個(gè)250個(gè)氨基酸的蛋白。FGF-23(氨基酸 1-24)的氨基酸-末端蛋白是疏水的且很可能用作是允許分泌進(jìn)入血液循環(huán)的信號(hào)肽。它的羧基-末端蛋白(氨基酸 180-251)與其它FGF蛋白家族成員僅有限制的相同氨基酸。FGF-23是與FGF-21 (~24% 的氨基酸次療要相同)和FGF-19 (~22%的氨基酸次序相同) 最接近。
腎臟的磷酸鹽流失障礙導(dǎo)致血磷酸鹽過少是骨骼礦化和生長(zhǎng)板發(fā)展缺陷因素之一。有常染色體遺傳的低磷血癥(ADHR)的病人，罕見的遺傳基因混亂，攜帶制造一種不同變化轉(zhuǎn)變的FGF-23 的蛋白質(zhì)的抵抗蛋白水解的裂開。此外，腫瘤能引起瘤原性的骨軟化(OOM)已經(jīng)顯示過量表達(dá)的FGF-23 mRNA產(chǎn)生與其相同的效果并且血中異常濃度的FGF-23能導(dǎo)致腎臟的磷酸鹽流失障礙。一致的結(jié)論，在嚙齒動(dòng)物中應(yīng)用重組的FGF-23顯示增加尿中磷的排泄量因此導(dǎo)致血磷酸鹽過少和骨軟化/佝僂病�？傆�(jì)，所有現(xiàn)在的數(shù)據(jù)建議FGF-23直接或間接與磷酸鹽動(dòng)態(tài)平穩(wěn)規(guī)則有關(guān)。
測(cè)量人FGF-23在血液中循環(huán)可能提供重要的診斷工具用于實(shí)驗(yàn)室評(píng)估各種各樣不同的血磷酸鹽流失障礙，包括瘤原性的骨軟化，X-鏈鎖低磷血癥性佝僂病和常染色體遺傳血磷酸鹽過少佝僂病。此外，靈敏地檢測(cè)FGF-23可能提供對(duì)骨骼和礦物動(dòng)態(tài)平衡規(guī)則的新的見識(shí)。
測(cè)試原理
人FGF-23
(C-端) ELISA 試劑盒是雙位點(diǎn)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)血清、血漿或細(xì)胞培養(yǎng)中FGF-23。兩個(gè)親合純化的山羊多克隆抗體經(jīng)過挑選檢測(cè)FGF-23的羥基-末端(C-端)的抗原決定部位。一個(gè)抗體是固定在微量孔中包被。另一個(gè)抗體是生物素與辣根過氧化物酶(HRP)與抗生物素蛋白共扼結(jié)合檢測(cè)。
包含FGF-23的樣本與固相捕獲抗體和生物素抗體同時(shí)在微量孔中孵育。樣本中包含的FGF-23與捕獲抗體和檢測(cè)抗體免疫結(jié)合形成“夾心抗體”復(fù)合物：
微量孔/抗人類FGF—人類FGF-23—生物素/抗人類FGF
(C-端)
(C-端)
在這個(gè)孵育期末，清洗微量孔去除任何未結(jié)合抗體和其它物質(zhì)。固定的夾心抗體復(fù)合物與HRP-抗生素同步孵育允許酶結(jié)合到生物素抗體。在孵育的末期再次清洗微量孔移出未結(jié)合的物質(zhì)。微量孔中的酶結(jié)合物與底物溶液同時(shí)孵育反應(yīng)并且用分光光度微量板讀數(shù)儀檢測(cè)�？贵w復(fù)合物結(jié)合到微量板中的活性與樣本中的FGF-23數(shù)量成正比。標(biāo)準(zhǔn)曲線由繪制吸光度VS每個(gè)FGF-23標(biāo)準(zhǔn)品的濃度形成線性或?qū)?shù)曲線。樣本中人類FGF-23的濃度直接從曲線中查找。