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腎上腺皮質(zhì)酮檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法)

英文名稱:Corticosterone ELA

   生產(chǎn)廠商:艾狄斯

【簡介】

本產(chǎn)品僅供科研使用。

IDS公司的腎上腺皮質(zhì)酮酶免試劑盒是用競爭法酶聯(lián)免疫分析法(EIA)定量檢測大、小鼠血清/血漿中的皮質(zhì)酮


【概要說明】

腎上腺皮質(zhì)酮(4-孕烯醇酮-11,12-二醇-3,20-二酮)是由腎上腺皮質(zhì)分泌的,在大、小鼠體內(nèi)發(fā)現(xiàn)的主要糖皮質(zhì)激素。循環(huán)中大部分腎上腺皮質(zhì)酮由皮質(zhì)類固醇結(jié)合球蛋白運(yùn)載。大、小鼠的皮質(zhì)酮水平與人類皮質(zhì)中的數(shù)量狀態(tài)相類似,可作為腎上腺功能的指標(biāo)使用。我們能從促腎上腺皮質(zhì)激素的釋放(促進(jìn)分泌)和通過地賽米松或垂體切除術(shù)(抑制分泌)中觀察其反應(yīng)。在循環(huán)中,壓力也同樣扮演了一個(gè)非常重要的角色。壓力情形將導(dǎo)致腎上腺皮質(zhì)酮水平迅速增加,這些壓力情形包括溫度的改變、實(shí)驗(yàn)的刺激或非常規(guī)事件的出現(xiàn)。

 

【方法描述】

IDS公司的腎上腺皮質(zhì)酮酶免試劑盒采用競爭法酶聯(lián)免疫分析法,該方法利用多克隆抗體包被至聚苯乙烯微量板內(nèi)表層。定標(biāo)、質(zhì)控和稀釋樣本與標(biāo)上腎上腺皮質(zhì)酮的酶(辣根過氧化物酶)在包被抗體微量孔中2-8°C下一同孵育過夜。清洗微量孔并用發(fā)色底物(TMB)使其生成顏色。停止反應(yīng)混合物并在微量板讀數(shù)儀上讀取其吸光度,顏色的強(qiáng)度與樣本中腎上腺皮質(zhì)酮的的濃度成反比。


【樣本收集和保存】

該檢測應(yīng)使用血清或血漿樣本(EDTA、肝素、檸檬酸鹽)。樣本在收集后應(yīng)立即進(jìn)行離心分離。如需長期保存,應(yīng)儲(chǔ)存在-20°C。避免反復(fù)凍溶樣本。


操作簡介


樣本稀釋

30 μL的樣本

270 μL的樣本稀釋液SAMPDIL。旋渦混勻

 

檢測

加入100 μL標(biāo)準(zhǔn)液CAL ,質(zhì)控液CTRL或稀釋后的樣本至抗體包被的微量板中MICROPLAT .

加入100 μL的酶結(jié)合物溶液

孵育:16-24小時(shí)@ 2-8°C

洗板

加入200 μL TMB底物SUBS

孵育:30分鐘 @ 18-25°C.

 加入100 μL終止液HCL

                                                                     讀板 @ 405nm.



參考文獻(xiàn)

1.     Corker C.S. Karolinska Symposia on Research Methods in Reproductive Endocrinology : Steroid Assay by Protein Binding. E. Diczfalusy, ed., p 153 (1970).

2.     Keith L. D., Winslow J. R. and Reynolds R. W. Steroids, 31: 523 (1978).

3.     Shimizu K., Amagaya S. and Ogihara Y. : Analysis of Corticosterone in the serum of mice and rats, using high performance liquid chromatography. J. Chromatography, 272: 170

4.      Vining R.F., James D. E., Bennett S. P. and Kraegen E. W. Steroids, 38: 297 (1981)

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