英文名稱：RatTRAP Assay Kit
【預(yù)期用途】
本產(chǎn)品僅供科研使用。
RatTRAPTM test是一種用來測定大鼠血樣中來源于破骨細(xì)胞的抗酒石酸性磷酸酶5b（TRAP5b）的固相酶聯(lián)免疫活性測定。
【概要說明】
TRAP是破骨細(xì)胞骨吸收中表達(dá)并被釋放進(jìn)入血循環(huán)。因此，血清TRAP被認(rèn)為是有效測定骨吸收速率的潛在標(biāo)記物。然而，一些問題阻止了特異性TRAP分析的發(fā)展，包括血清中一些其它酸性磷酸酶，兩種TRACP的異構(gòu)重組產(chǎn)物——5a和5b，活躍或不活躍的TRAP分子及循環(huán)中一些碎片的干擾。
RatTRAP™分析方法是一個(gè)特異性檢測大鼠破骨細(xì)胞分泌到循環(huán)中的TRAP 5b。并且，RatTRAP™只檢測剛進(jìn)入循環(huán)之內(nèi)有活性的TRAP分子。該方法不會(huì)檢測到在循環(huán)中沒有活性的TRAP分子或碎片。因此，RatTRAP™分析方法能準(zhǔn)確評估在樣本采集時(shí)的骨吸收速率的數(shù)量。
【應(yīng)用】
RatTRAP™分析能用于監(jiān)測睪丸切除術(shù)和卵巢切除術(shù)后大鼠模型的骨吸收速率的改變。然而,該分析方法的使用存在著一些限制。我們推薦在手術(shù)操作前提取血清樣本(日子0，基準(zhǔn)樣本，非常重要)，在手術(shù)操作后的1,2,4,7 和 14 天提取血清樣本。在每個(gè)時(shí)間點(diǎn)都必須包括一個(gè)假設(shè)群體作為正常水平組。我們的結(jié)果出示血清TRAP 5b水平在睪丸切除術(shù)和卵巢切除術(shù)之后的幾天內(nèi)快速上升, 然后在手術(shù)后2個(gè)星期又回重到正常的水平。在那個(gè)時(shí)間點(diǎn)之后，TRAP 5b水平不再高于正常值。
【原理】
RatTRAP™使用一個(gè)高特異性的單克隆抗體是以重組巴氏病毒激發(fā)的RatTRAP作為抗原產(chǎn)生的。在測試中，抗體在包被有抗鼠IgG的單克隆抗體微量孔中孵育。洗滌之后，標(biāo)準(zhǔn)品，質(zhì)控品和血清樣本在微量孔孵育，并且測定TRAP 5b活性是在TRAP 5a失活而TRAP 5b高活性時(shí)的PH下，利用發(fā)光底物酶顯色。反應(yīng)被終止，反應(yīng)混合物的吸光度在微量板讀數(shù)儀上讀取，顏色的亮度與樣本中TRACP 5b的活性和數(shù)量成正比。