芬蘭藥物檢測(cè)服務(wù)公司的體外破骨細(xì)胞檢測(cè)（OCL檢測(cè)）提供了一種確定抗骨吸收化合物對(duì)人破骨細(xì)胞分化或活性影響的獨(dú)特方法。在OCL檢測(cè)中，人類(lèi)骨髓源性破骨前體細(xì)胞在含有M-CSF和RANKL的96孔板牛骨切片上培養(yǎng)7天，讓它們分化為成熟的骨吸收破骨細(xì)胞。
在培養(yǎng)初期，通過(guò)向培養(yǎng)液加入化合物，可以研究化合物對(duì)破骨細(xì)胞分化的影響。該培養(yǎng)在第7天結(jié)束，分泌的抗酒石酸酸性磷酸酶5b（TRACP 5b）（破骨細(xì)胞數(shù)量的標(biāo)志物）可用BoneTRAP試劑盒來(lái)對(duì)培養(yǎng)液進(jìn)行測(cè)定。（英國(guó)IDS 公司）
在破骨細(xì)胞分化后的第7天，通過(guò)向培養(yǎng)液加入化合物，可以研究化合物對(duì)破骨細(xì)胞活性的影響。第7天時(shí)更換培養(yǎng)液，TRACP 5b從第7天的培養(yǎng)液中測(cè)定，以此確定在添加化合物前破骨細(xì)胞的數(shù)量。繼續(xù)培養(yǎng)3天，使成熟的破骨細(xì)胞進(jìn)行骨的再吸收。在第10天，I型膠原C末端肽（CTX），骨膠原降解和重吸收量的標(biāo)志物，使用I型膠原C末端肽培養(yǎng)法（英國(guó)IDS 公司）對(duì)培養(yǎng)液進(jìn)行測(cè)定。最后，一個(gè)表征破骨細(xì)胞平均活性的重吸收指標(biāo)可以通過(guò)用破骨細(xì)胞的數(shù)量（第7天的TRACP 5b）除吸收獲得量（第10天的CTX）計(jì)算得出。如果有需要，我們的破骨細(xì)胞活性測(cè)試同樣能采用大鼠破骨細(xì)胞完成。
本公司提供兩種標(biāo)準(zhǔn)項(xiàng)目類(lèi)型的OCL檢測(cè)，初步項(xiàng)目和擴(kuò)展項(xiàng)目。初步項(xiàng)目為快速檢測(cè)大量化合物而設(shè)計(jì)的，每種化合物在2種不同濃度下重復(fù)檢測(cè)6次。本公司推薦使用初步項(xiàng)目的結(jié)果遴選合適的化合物進(jìn)行擴(kuò)展項(xiàng)目的深入檢測(cè)。擴(kuò)展項(xiàng)目每種化合物在7種不同濃度下重復(fù)檢測(cè)8次，可得到化合物IC50值的可靠計(jì)算。細(xì)胞毒性檢測(cè)是為確定在檢測(cè)中所觀察到的抑制功效不是由破骨細(xì)胞化合物的細(xì)胞毒素功效所致。
每一個(gè)96孔板包括與所有實(shí)驗(yàn)組的結(jié)果進(jìn)行對(duì)照、加有賦形劑的基準(zhǔn)組，和檢測(cè)系統(tǒng)中體現(xiàn)期望功效的參照化合物的質(zhì)控組。在破骨細(xì)胞分化檢測(cè)中，參考化合物是護(hù)骨素，破骨細(xì)胞分化的抑制劑。在破骨細(xì)胞活性檢測(cè)中，參照化合物是E64，半胱氨酸蛋白酶和破骨細(xì)胞活性的抑制劑。如果質(zhì)控組的結(jié)果與基準(zhǔn)組的結(jié)果沒(méi)有太大的區(qū)別，本公司將重復(fù)檢測(cè)而不收取客戶額外費(fèi)用。
情況說(shuō)明書(shū)
芬蘭藥物檢測(cè)服務(wù)公司的OCL檢測(cè)是確定抗骨吸收化合物對(duì)人破骨細(xì)胞影響的獨(dú)特設(shè)計(jì)。我們提供OCL的以下標(biāo)準(zhǔn)項(xiàng)目類(lèi)型：
初步項(xiàng)目：在2種不同濃度條件下重復(fù)檢測(cè)6次
擴(kuò)展項(xiàng)目：在7種不同濃度條件下重復(fù)檢測(cè)8次
本公司所有的工作都遵從質(zhì)量保證體系和標(biāo)準(zhǔn)操作流程（S.O.P）完成。在開(kāi)展新項(xiàng)目前，本公司將和客戶一起準(zhǔn)備詳細(xì)的研究方案，并且本公司的研究主任將確保該項(xiàng)目按研究方案所擬定的內(nèi)容精確完成。
典型周轉(zhuǎn)周期：
初步項(xiàng)目： 可達(dá)50種化合物/2月
擴(kuò)展項(xiàng)目： 可達(dá)10種化合物/2月
本產(chǎn)品僅供科研使用