英夫利昔單抗（類克）抗體定性檢測試劑盒（酶聯(lián)免疫法）
SHIKARI® (Q-ATI) Qualitative Antibodies to Infliximab ELISA
| 貨號 |
INF-QLS-REMI |
| 規(guī)格 |
96人份/盒 |
| 檢測時間 |
140min |
| 樣本類型 |
血清、血漿 |
| 樣本量 |
20μl |
| 回收率 |
85-115% |
| 檢測限 |
15ng/mL |
| 方法學(xué) |
酶聯(lián)免疫法 |
| 生產(chǎn)商 |
土耳其MATRIKS BIOTEK |
預(yù)期用途
用于定性分析血清和血漿樣本中的英夫利昔單抗抗體。本試劑盒用類克®進行優(yōu)化。僅供科研使用。
背景知識
英夫利昔單抗是一種腫瘤壞死因子(TNFα)拮抗劑，是一種嵌合單克隆IgG1抗體，由人類恒定區(qū)（75%）和鼠可變區(qū)（25%）組成。英夫利昔單抗是通過持續(xù)灌注培養(yǎng)的重組細胞系產(chǎn)生的。TNFα是一種關(guān)鍵促炎細胞因子，與慢性炎癥疾病有關(guān)。在炎癥疾病中可以觀察到它的過度活躍和增強的信號通路，在炎癥疾病中它進一步激活促炎級聯(lián)反應(yīng)。通過與可溶性亞基和TNFα的膜結(jié)合前體結(jié)合，英夫利昔單抗破壞TNFα與其受體的相互作用，也可能導(dǎo)致產(chǎn)生TNFα的細胞溶解。
英夫利昔單抗是一種IgG1κ單克隆抗體，以高親和力與可溶性和跨膜形式的TNFα結(jié)合，破壞促炎級聯(lián)信號�？贵w與TNFα的結(jié)合阻止了TNFα與其受體相互作用。英夫利昔單抗不能中和TNFα（淋巴毒素-α），這是一種使用與TNFα相同受體的相關(guān)細胞因子。TNFα的阻斷作用進一步導(dǎo)致局部和全身促炎細胞因子（即IL-1、IL-6）的下調(diào)、淋巴細胞和白細胞向炎癥部位遷移的減少、誘導(dǎo)TNF產(chǎn)生細胞（即激活的單核細胞和T淋巴細胞）的凋亡、核因子-κB抑制劑水平的升高，以及內(nèi)皮粘附分子和急性期蛋白的減少。其對TNFα的抑制作用在人成纖維細胞、內(nèi)皮細胞、中性粒細胞、B和T淋巴細胞以及上皮細胞中得到證實。英夫利昔單抗還可以抑制滑膜細胞和/或軟骨細胞合成的組織降解酶的產(chǎn)生。
治療藥物監(jiān)測(TDM)是在指定的時間間隔測量特定藥物的臨床實踐，以保持患者血液中的恒定濃度，從而優(yōu)化個體給藥方案。藥物監(jiān)測的適應(yīng)癥包括療效、依從性、藥物-藥物相互作用、毒性避免和治療停止監(jiān)測。此外，TDM有助于發(fā)現(xiàn)不依從患者的用藥依從性問題。
21世紀，生物醫(yī)藥產(chǎn)品（生物制劑）改變了世界范圍內(nèi)血液或?qū)嶓w惡性腫瘤患者的治療格局。如今，隨著第一波生物制劑的專利獨占期即將到期或已經(jīng)到期，一些生物仿制藥產(chǎn)品（即被認為在質(zhì)量、安全性和有效性方面與批準的“仿制”生物制劑類似的生物制劑）正在開發(fā)或已被批準供人類使用。
與所有生物制劑一樣，生物仿制藥是一種結(jié)構(gòu)復(fù)雜的蛋白質(zhì)，通常使用轉(zhuǎn)基因動物、細菌或植物細胞培養(yǎng)系統(tǒng)制造。由于這種分子復(fù)雜性和制造過程的獨有性質(zhì)，不可避免地會導(dǎo)致使用不同的宿主細胞系和表達系統(tǒng)以及制造條件的相關(guān)差異，因此不可能制造出與“仿制”生物制劑一樣的精確制劑。
當給患者服用時，所有治療性蛋白質(zhì)都有可能誘發(fā)不必要的免疫反應(yīng)（即刺激抗藥物抗體[ADAs]的形成）。免疫反應(yīng)的影響范圍從無明顯影響到藥代動力學(xué)變化、療效喪失和嚴重不良事件。此外，生物制劑的免疫原性特征可能會因其生產(chǎn)過程中的微小差異而顯著改變，這些差異伴隨著產(chǎn)品屬性的變化，以及給藥計劃、給藥途徑或患者群體的差異。
SHIKARI®酶聯(lián)免疫法檢測試劑盒可用于測量藥物濃度和抗藥物抗體。SHIKARI®英夫利昔單抗酶聯(lián)免疫法產(chǎn)品線：
| 品牌 |
描述 |
貨號 |
| SHIKARI® (Q-INFLIXI) |
英夫利昔單抗（類克®） |
游離藥物 |
INF-FD-REMI |
| SHIKARI® (Q-ATI) |
英夫利昔單抗（類克®） |
抗體篩查 – 定性 |
INF-QLS-REMI |
| SHIKARI® (Q-ATI) |
英夫利昔單抗（類克®） |
抗體篩查 – 定量 |
INF-QNS-REMI |
| SHIKARI® (Q-ATIDUO) |
英夫利昔單抗（類克®） |
抗體篩查 – 游離/總半定量 |
INF-QNFT-REMI |
| SHIKARI® (Q-REMS) |
英夫利昔單抗（生物類似藥） |
游離藥物 |
INF-FD-REMS |
| SHIKARI® (S-AIR) |
英夫利昔單抗（生物類似藥） |
抗體篩查 – 定性 |
INF-QLS-REMS |
| SHIKARI® (S-AIR) |
英夫利昔單抗（生物類似藥） |
抗體篩查 – 定量 |
INF-QNS-REMS |
| SHIKARI® (S-AIR) |
英夫利昔單抗（生物類似藥） |
抗體篩查 – 游離/總半定量 |
INF-QNFT-REMS |
主要組成成分
| 組分標簽 |
規(guī)格 |
組分說明 |
| Microtiter Plate |
12 x 8孔 |
微孔板
拆開的微孔板條。微孔板12排，每排8孔，包被英夫利昔單抗。 |
| Controls |
1 mL(陰性)
1 mL(陽性) |
陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品
即用型。含有人血清和穩(wěn)定劑， < 0.1% NaN3。 |
| Assay Buffer |
1 x 50 mL |
檢測緩沖液
即用型。藍色，含有蛋白質(zhì)，< 0.1% NaN3。 |
| Conjugate |
1 x 12 mL |
辣根過氧化物酶結(jié)合物
即用型。紅色。含有HRP結(jié)合物、穩(wěn)定劑和防腐劑。 |
| Substrate |
1 x 12 mL |
TMB底物溶液
即用型。含有3, 3′, 5, 5′ -四甲基聯(lián)苯胺(TMB)。 |
| Stop Buffer |
1 x 12 mL |
TMB終止液
即用型，1N HCI。 |
| Wash Buffer |
1 x 50 mL |
濃縮洗液(20x)
濃縮洗液(20x)應(yīng)在實驗前按照【試劑準備】中給出的稀釋比例進行稀釋。
含有吐溫20的緩沖液。 |
| Foil |
2塊 |
封板膜
孵育時封蓋微孔板 |
儲存條件及有效期
試劑盒在10-30°C下運輸，應(yīng)在2-8°C下長期儲存。遠離熱源或避免陽光直射。已開封的微孔板條，在2-8°C下保存在密封袋中，可穩(wěn)定至試劑盒標示的有效期。
工作洗液配制后須儲存于密封容器中，在2-8℃下可保存2周。
生產(chǎn)日期及失效日期見試劑盒標簽。
適用儀器
適用于具有450nm、650nm波長的酶標儀。
樣本要求
血清、血漿（EDTA、肝素）
應(yīng)遵守靜脈穿刺的常規(guī)預(yù)防措施。不要使用嚴重溶血、黃疸或血脂樣本。實驗前，應(yīng)先對混濁的樣本進行離心，以去除任何顆粒物質(zhì)。避免血清或血漿樣本反復(fù)凍融。
實驗前，應(yīng)按照【試劑準備】中給出的稀釋比例對樣本進行稀釋。
藥物輸注可能會偽裝或掩蓋血清或血漿樣本中藥物抗體的存在。因此，采血時間對于抗體檢測至關(guān)重要。建議在預(yù)定劑量（峰谷樣本）之前采集血樣。
樣本保存
血清或血漿樣本在2-8℃可保存2天，在-20℃下可保存6個月。
性能指標
特異性：與天然血清免疫球蛋白無交叉反應(yīng)。
精確度：批內(nèi)和批間CVs < 30%。
臨界值：必須由用戶/實驗室根據(jù)科學(xué)標準計算/設(shè)定或驗證臨界值。
質(zhì)控報告包含特定批號的性能指標數(shù)據(jù)，并隨每個試劑盒單獨提供。如果需要更多的性能指標數(shù)據(jù)，請咨詢代理商。
參考文獻
1. Present DH, Rutgeerts P, Targan S, Hanauer SB, Mayer L, van Hogezand RA, Podolsky DK, Sands BE, Braakman T, DeWoody KL, Schaible TF, van Deventer SJ. Infliximab for the treatment of fistulas in patients with Crohn's disease. N Engl J Med 1999 May 6;340(18):1398-405.
2. Klotz U, Teml A, Schwab M. Clinical pharmacokinetics and use of infliximab. Clin Pharmacokinet 2007;46(8):645-60.
3. Remicade® (infliximab) product monograph
Remsima® (infliximab) product monograph
