英夫利昔單抗（類(lèi)克）抗體定量檢測(cè)試劑盒（酶聯(lián)免疫法）
SHIKARI® (Q-ATI) Quantitative Antibodies to Infliximab ELISA
| 貨號(hào) |
INF-QNS-REMI |
| 規(guī)格 |
96人份/盒 |
| 檢測(cè)時(shí)間 |
140min |
| 樣本類(lèi)型 |
血清、血漿 |
| 樣本量 |
20μl |
| 回收率 |
85-115% |
| 檢測(cè)限 |
15ng/mL |
| 方法學(xué) |
酶聯(lián)免疫法 |
| 生產(chǎn)商 |
土耳其MATRIKS BIOTEK |
預(yù)期用途
用于定量分析血清和血漿樣本中的英夫利昔單抗抗體。本試劑盒用類(lèi)克®進(jìn)行優(yōu)化。僅供科研使用。
背景知識(shí)
英夫利昔單抗是一種腫瘤壞死因子(TNFα)拮抗劑，是一種嵌合單克隆IgG1抗體，由人類(lèi)恒定區(qū)（75%）和鼠可變區(qū)（25%）組成。英夫利昔單抗是通過(guò)持續(xù)灌注培養(yǎng)的重組細(xì)胞系產(chǎn)生的。TNFα是一種關(guān)鍵促炎細(xì)胞因子，與慢性炎癥疾病有關(guān)。在炎癥疾病中可以觀察到它的過(guò)度活躍和增強(qiáng)的信號(hào)通路，在炎癥疾病中它進(jìn)一步激活促炎級(jí)聯(lián)反應(yīng)。通過(guò)與可溶性亞基和TNFα的膜結(jié)合前體結(jié)合，英夫利昔單抗破壞TNFα與其受體的相互作用，也可能導(dǎo)致產(chǎn)生TNFα的細(xì)胞溶解。
英夫利昔單抗是一種IgG1κ單克隆抗體，以高親和力與可溶性和跨膜形式的TNFα結(jié)合，破壞促炎級(jí)聯(lián)信號(hào)�？贵w與TNFα的結(jié)合阻止了TNFα與其受體相互作用。英夫利昔單抗不能中和TNFα（淋巴毒素-α），這是一種使用與TNFα相同受體的相關(guān)細(xì)胞因子。TNFα的阻斷作用進(jìn)一步導(dǎo)致局部和全身促炎細(xì)胞因子（即IL-1、IL-6）的下調(diào)、淋巴細(xì)胞和白細(xì)胞向炎癥部位遷移的減少、誘導(dǎo)TNF產(chǎn)生細(xì)胞（即激活的單核細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞）的凋亡、核因子-κB抑制劑水平的升高，以及內(nèi)皮粘附分子和急性期蛋白的減少。其對(duì)TNFα的抑制作用在人成纖維細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、B和T淋巴細(xì)胞以及上皮細(xì)胞中得到證實(shí)。英夫利昔單抗還可以抑制滑膜細(xì)胞和/或軟骨細(xì)胞合成的組織降解酶的產(chǎn)生。
治療藥物監(jiān)測(cè)(TDM)是在指定的時(shí)間間隔測(cè)量特定藥物的臨床實(shí)踐，以保持患者血液中的恒定濃度，從而優(yōu)化個(gè)體給藥方案。藥物監(jiān)測(cè)的適應(yīng)癥包括療效、依從性、藥物-藥物相互作用、毒性避免和治療停止監(jiān)測(cè)。此外，TDM有助于發(fā)現(xiàn)不依從患者的用藥依從性問(wèn)題。
21世紀(jì)，生物醫(yī)藥產(chǎn)品（生物制劑）改變了世界范圍內(nèi)血液或?qū)嶓w惡性腫瘤患者的治療格局。如今，隨著第一波生物制劑的專(zhuān)利獨(dú)占期即將到期或已經(jīng)到期，一些生物仿制藥產(chǎn)品（即被認(rèn)為在質(zhì)量、安全性和有效性方面與批準(zhǔn)的“仿制”生物制劑類(lèi)似的生物制劑）正在開(kāi)發(fā)或已被批準(zhǔn)供人類(lèi)使用。
與所有生物制劑一樣，生物仿制藥是一種結(jié)構(gòu)復(fù)雜的蛋白質(zhì)，通常使用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物、細(xì)菌或植物細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)制造。由于這種分子復(fù)雜性和制造過(guò)程的獨(dú)有性質(zhì)，不可避免地會(huì)導(dǎo)致使用不同的宿主細(xì)胞系和表達(dá)系統(tǒng)以及制造條件的相關(guān)差異，因此不可能制造出與“仿制”生物制劑一樣的精確制劑。
當(dāng)給患者服用時(shí)，所有治療性蛋白質(zhì)都有可能誘發(fā)不必要的免疫反應(yīng)（即刺激抗藥物抗體[ADAs]的形成）。免疫反應(yīng)的影響范圍從無(wú)明顯影響到藥代動(dòng)力學(xué)變化、療效喪失和嚴(yán)重不良事件。此外，生物制劑的免疫原性特征可能會(huì)因其生產(chǎn)過(guò)程中的微小差異而顯著改變，這些差異伴隨著產(chǎn)品屬性的變化，以及給藥計(jì)劃、給藥途徑或患者群體的差異。
SHIKARI®酶聯(lián)免疫法檢測(cè)試劑盒可用于測(cè)量藥物濃度和抗藥物抗體。SHIKARI®英夫利昔單抗酶聯(lián)免疫法產(chǎn)品線(xiàn)：
| 品牌 |
描述 |
貨號(hào) |
| SHIKARI® (Q-INFLIXI) |
英夫利昔單抗（類(lèi)克®） |
游離藥物 |
INF-FD-REMI |
| SHIKARI® (Q-ATI) |
英夫利昔單抗（類(lèi)克®） |
抗體篩查 – 定性 |
INF-QLS-REMI |
| SHIKARI® (Q-ATI) |
英夫利昔單抗（類(lèi)克®） |
抗體篩查 – 定量 |
INF-QNS-REMI |
| SHIKARI® (Q-ATIDUO) |
英夫利昔單抗（類(lèi)克®） |
抗體篩查 – 游離/總半定量 |
INF-QNFT-REMI |
| SHIKARI® (Q-REMS) |
英夫利昔單抗（生物類(lèi)似藥） |
游離藥物 |
INF-FD-REMS |
| SHIKARI® (S-AIR) |
英夫利昔單抗（生物類(lèi)似藥） |
抗體篩查 – 定性 |
INF-QLS-REMS |
| SHIKARI® (S-AIR) |
英夫利昔單抗（生物類(lèi)似藥） |
抗體篩查 – 定量 |
INF-QNS-REMS |
| SHIKARI® (S-AIR) |
英夫利昔單抗（生物類(lèi)似藥） |
抗體篩查 – 游離/總半定量 |
INF-QNFT-REMS |
主要組成成分
| 組分標(biāo)簽 |
規(guī)格 |
組分說(shuō)明 |
| Microtiter Plate |
12 x 8孔 |
微孔板
拆開(kāi)的微孔板條。微孔板12排，每排8孔，包被英夫利昔單抗。 |
| Standard A-E |
1.0 mL/瓶 |
校準(zhǔn)品A-E
校準(zhǔn)品A: 500 ng/mL
校準(zhǔn)品B: 250 ng/mL
校準(zhǔn)品C: 125 ng/mL
校準(zhǔn)品D: 62.5 ng/mL
校準(zhǔn)品E: 0 ng/mL
即用型。用于校準(zhǔn)曲線(xiàn)。含有英夫利昔單抗抗體、人血清和穩(wěn)定劑，< 0.1% NaN3。 |
| Controls |
1.0 mL/瓶 |
低濃度和高濃度質(zhì)控品
即用型。含有人血清和穩(wěn)定劑，< 0.1% NaN3。
濃度詳見(jiàn)質(zhì)控報(bào)告 |
| Assay Buffer |
1 x 50 mL |
檢測(cè)緩沖液
即用型。藍(lán)色。含有蛋白質(zhì)，< 0.1% NaN3。 |
| Conjugate |
1 x 12 mL |
辣根過(guò)氧化物酶(HRP)結(jié)合物
即用型。紅色。含有HRP結(jié)合物、穩(wěn)定劑和防腐劑。 |
Confirmation
Reagent |
1 x 12 mL |
確認(rèn)試劑
即用型。含有蛋白質(zhì)、英夫利昔單抗和穩(wěn)定劑，0.1% NaN3。 |
| Substrate |
1 x 12 mL |
TMB底物溶液
即用型。含有3, 3′, 5, 5′ -四甲基聯(lián)苯胺(TMB)。 |
| Stop Buffer |
1 x 12 mL |
TMB終止液
即用型。1N HCI。 |
| Wash Buffer |
1 x 50 mL |
濃縮洗液(20x)
濃縮洗液(20x)應(yīng)在實(shí)驗(yàn)前按照【試劑準(zhǔn)備】中給出的稀釋比例進(jìn)行稀釋。
含有吐溫20的緩沖液。 |
| Foil |
2塊 |
封板膜
孵育時(shí)封蓋微孔板 |
儲(chǔ)存條件及有效期
試劑盒在10-30°C下運(yùn)輸，應(yīng)在2-8°C下長(zhǎng)期儲(chǔ)存。遠(yuǎn)離熱源或避免陽(yáng)光直射。已開(kāi)封的微孔板條，在2-8°C下保存在密封袋中，可穩(wěn)定至試劑盒標(biāo)示的有效期。
工作洗液配制后須儲(chǔ)存于密封容器中，在2-8℃下可保存2周。
生產(chǎn)日期及失效日期見(jiàn)試劑盒標(biāo)簽。
適用儀器
適用于具有450nm、650nm波長(zhǎng)的酶標(biāo)儀。
樣本要求
血清、血漿（EDTA、肝素）
應(yīng)遵守靜脈穿刺的常規(guī)預(yù)防措施。不要使用嚴(yán)重溶血、黃疸或血脂樣本。實(shí)驗(yàn)前，應(yīng)先對(duì)混濁的樣本進(jìn)行離心，以去除任何顆粒物質(zhì)。避免血清或血漿樣本反復(fù)凍融。
實(shí)驗(yàn)前，應(yīng)按照【試劑準(zhǔn)備】中給出的稀釋比例對(duì)樣本進(jìn)行稀釋。
藥物輸注可能會(huì)偽裝或掩蓋血清或血漿樣本中藥物抗體的存在。因此，采血時(shí)間對(duì)于抗體檢測(cè)至關(guān)重要。建議在預(yù)定劑量（峰谷樣本）之前采集血樣。
樣本保存
血清或血漿樣本在2-8℃可保存2天，在-20℃下可保存6個(gè)月。
性能指標(biāo)
校準(zhǔn)曲線(xiàn)（線(xiàn)性、稀釋線(xiàn)性）：r
2 > 0.95
靈敏度：可與校準(zhǔn)品0區(qū)分的最低檢測(cè)水平（檢測(cè)限，LOD）為6.2 ng/mL。
功能敏感度（定量限，LOQ）：62 ng/mL。
特異性：與天然血清免疫球蛋白無(wú)交叉反應(yīng)。
回收率 < 100 ± 30%。
精密度：批內(nèi)和批間CVs < 30%。
臨界值：用戶(hù)/實(shí)驗(yàn)室必須根據(jù)科學(xué)標(biāo)準(zhǔn)計(jì)算/設(shè)置或驗(yàn)證臨界值。
質(zhì)控報(bào)告包含特定批號(hào)的性能指標(biāo)數(shù)據(jù)，并隨每個(gè)試劑盒單獨(dú)提供。如果需要更多的性能指標(biāo)數(shù)據(jù)，請(qǐng)咨詢(xún)代理商。
參考文獻(xiàn)
1. Present DH, Rutgeerts P, Targan S, Hanauer SB, Mayer L, van Hogezand RA, Podolsky DK, Sands BE, Braakman T, DeWoody KL, Schaible TF, van Deventer SJ. Infliximab for the treatment of fistulas in patients with Crohn's disease. N Engl J Med 1999 May 6;340(18):1398-405.
2. Klotz U, Teml A, Schwab M. Clinical pharmacokinetics and use of infliximab. Clin Pharmacokinet 2007;46(8):645-60.
3. Remicade® (infliximab) product monograph
4. Remsima® (infliximab) product monograph
