游離依那西普單抗藥物（恩利）濃度檢測試劑盒（酶聯(lián)免疫法）
SHIKARI® (Q-ETA) Etanercept ELISA
| 貨號 |
ETA-FD-ENB |
| 規(guī)格 |
96人份/盒 |
| 檢測時間 |
70min |
| 樣本類型 |
血清、血漿 |
| 樣本量 |
20μl |
| 回收率 |
85-115% |
| 檢測限 |
100 ng/mL |
| 方法學(xué) |
酶聯(lián)免疫法 |
| 生產(chǎn)商 |
土耳其MATRIKS BIOTEK |
預(yù)期用途
用于定量分析血清和血漿樣本中的游離依那西普單抗。本試劑盒用恩利®進(jìn)行優(yōu)化。僅供科研使用。
背景知識
二聚體融合蛋白由與人IgG1的Fc部分連接的人75千道爾頓(p75)腫瘤壞死因子受體(TNFR)的細(xì)胞外配體結(jié)合部分組成。依那西普的Fc成分包含CH2結(jié)構(gòu)域、CH3結(jié)構(gòu)域和鉸鏈區(qū)，但不包含IgG1的CH1結(jié)構(gòu)域。依那西普是通過重組DNA技術(shù)在中國倉鼠卵巢(CHO)哺乳動物細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)中產(chǎn)生的。它由934個氨基酸組成。
TNF(TNFRs)有兩種不同的受體，即55千道爾頓蛋白(p55)和75千道爾頓蛋白(p75)。TNF的生物活性取決于與任一細(xì)胞表面受體(p75或p55)的結(jié)合。依那西普是p75 TNF受體的二聚體可溶性形式，可以與兩個TNF分子結(jié)合，從而有效地將其從循環(huán)中清除。依那西普與腫瘤壞死因子(TNF)特異性結(jié)合，從而調(diào)節(jié)由TNF誘導(dǎo)或調(diào)節(jié)的生物過程。這些受影響的過程或分子包括表達(dá)的粘附分子水平，以及細(xì)胞因子和基質(zhì)金屬蛋白酶3（也稱為基質(zhì)分解素）的血清水平。
治療藥物監(jiān)測(TDM)是在指定的時間間隔測量特定藥物的臨床實踐，以保持患者血液中的恒定濃度，從而優(yōu)化個體給藥方案。藥物監(jiān)測的適應(yīng)癥包括療效、依從性、藥物-藥物相互作用、毒性避免和治療停止監(jiān)測。此外，TDM有助于發(fā)現(xiàn)不依從患者的用藥依從性問題。
21世紀(jì)，生物醫(yī)藥產(chǎn)品（生物制劑）改變了世界范圍內(nèi)血液或?qū)嶓w惡性腫瘤患者的治療格局。如今，隨著第一波生物制劑的專利獨占期即將到期或已經(jīng)到期，一些生物仿制藥產(chǎn)品（即被認(rèn)為在質(zhì)量、安全性和有效性方面與批準(zhǔn)的“仿制”生物制劑類似的生物制劑）正在開發(fā)或已被批準(zhǔn)供人類使用。
與所有生物制劑一樣，生物仿制藥是一種結(jié)構(gòu)復(fù)雜的蛋白質(zhì)，通常使用轉(zhuǎn)基因動物、細(xì)菌或植物細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)制造。由于這種分子復(fù)雜性和制造過程的獨有性質(zhì)，不可避免地會導(dǎo)致使用不同的宿主細(xì)胞系和表達(dá)系統(tǒng)以及制造條件的相關(guān)差異，因此不可能制造出與“仿制”生物制劑一樣的精確制劑。
當(dāng)給患者服用時，所有治療性蛋白質(zhì)都有可能誘發(fā)不必要的免疫反應(yīng)（即刺激抗藥物抗體[ADAs]的形成）。免疫反應(yīng)的影響范圍從無明顯影響到藥代動力學(xué)變化、療效喪失和嚴(yán)重不良事件。此外，生物制劑的免疫原性特征可能會因其生產(chǎn)過程中的微小差異而顯著改變，這些差異伴隨著產(chǎn)品屬性的變化，以及給藥計劃、給藥途徑或患者群體的差異。
SHIKARI®酶聯(lián)免疫法檢測試劑盒可用于測量藥物濃度和抗藥物抗體。SHIKARI®依那西普單抗酶聯(lián)免疫法產(chǎn)品線：
| 品牌 |
描述 |
貨號 |
| SHIKARI® (Q-ETA) |
依那西普單抗 |
游離藥物 |
ETA-FD-ENB |
| SHIKARI® (S-ATE) |
依那西普單抗 |
抗體篩查 – 定性 |
ETA-QLS-ENB |
主要組成成分
| 組分標(biāo)簽 |
規(guī)格 |
組分說明 |
| Microtiter Plate |
12 x 8孔 |
拆開的微孔板條。微孔板條有12排，每排8孔，包被反應(yīng)物。 |
| Standard A-E |
0.3 mL/瓶 |
校準(zhǔn)品A-E
校準(zhǔn)品A：3 mg/mL
校準(zhǔn)品B：1 mg/mL
校準(zhǔn)品C：0.3 mg/mL
校準(zhǔn)品D：0.1 mg/mL
校準(zhǔn)品E：0 mg/mL
即用型。用于校準(zhǔn)曲線和質(zhì)控品。含依那西普單抗、人血清和穩(wěn)定劑，< 0.1% NaN3。 |
| Controls |
0.3 mL/瓶 |
低濃度和高濃度質(zhì)控品
即用型。含人血清和穩(wěn)定劑，< 0.1% NaN3。
濃度詳見質(zhì)控報告。 |
| Assay Buffer |
1 x 50 mL |
檢測緩沖液
即用型。藍(lán)色。含有蛋白質(zhì)，< 0.1% NaN3。 |
| Conjugate |
1 x 12 mL |
辣根過氧化物酶結(jié)合物
即用型。紅色。含有HRP結(jié)合物、穩(wěn)定劑和防腐劑。 |
| Substrate |
1 x 12 mL |
TMB底物溶液
即用型。含有3, 3', 5, 5' -四甲基聯(lián)苯胺(TMB)。 |
| Stop Buffer |
1 x 12 mL |
TMB終止液
即用型。1N HCI。 |
| Wash Buffer |
1 x 50 mL |
濃縮洗液(20x)
濃縮洗液(20x)應(yīng)在實驗前按照【試劑準(zhǔn)備】中給出的稀釋比例進(jìn)行稀釋。
含有吐溫20的緩沖液。 |
| Foil |
2塊 |
封板膜
孵育期間覆蓋微孔板。 |
儲存條件及有效期
試劑盒在10-30°C下運輸，應(yīng)在2-8°C下長期儲存。遠(yuǎn)離熱源或避免陽光直射。已開封的微孔板條，在2-8°C下保存在密封袋中，可穩(wěn)定至試劑盒標(biāo)示的有效期。
工作洗液配制后須儲存于密封容器中，在2-8℃下可保存2周。
生產(chǎn)日期及失效日期見試劑盒標(biāo)簽。
適用儀器
適用于具有450nm、650nm波長的酶標(biāo)儀。
樣本要求
血清、血漿（EDTA、肝素）
應(yīng)遵守靜脈穿刺的常規(guī)預(yù)防措施。不要使用嚴(yán)重溶血、黃疸或血脂樣本。實驗前，應(yīng)先對混濁的樣本進(jìn)行離心，以去除任何顆粒物質(zhì)。避免血清或血漿樣本反復(fù)凍融。
實驗前，應(yīng)按照【試劑準(zhǔn)備】中給出的稀釋比例對樣本進(jìn)行稀釋。
藥物輸注可能會偽裝或掩蓋血清或血漿樣本中藥物抗體的存在。因此，采血時間對于抗體檢測至關(guān)重要。建議在預(yù)定劑量（峰谷樣本）之前采集血樣。
樣本保存
血清或血漿樣本在2-8℃可保存2天，在-20℃下可保存6個月。
性能指標(biāo)
校準(zhǔn)曲線（線性、稀釋線性）：r
2 > 0.95
靈敏度：可與校準(zhǔn)品0區(qū)分開的最低可檢測水平（檢測限，LOD）為0.005 μg/mL (5 ng/mL)。
功能敏感度（定量限-LOQ）：0.1 μg/mL (100 ng/mL)。
特異性：與天然血清免疫球蛋白無交叉反應(yīng)。
回歸率 < 100±30%。
精密度：批內(nèi)和批間CVs < 30%。
參考范圍/治療范圍：沒有任何共識。治療范圍可因年齡、性別和疾病而異。詳情請參閱最新文獻(xiàn)。
質(zhì)控報告包含特定批號的性能指標(biāo)數(shù)據(jù)，并隨每個試劑盒單獨提供。如果需要更多的性能指標(biāo)數(shù)據(jù)，請咨詢代理商。
參考文獻(xiàn)
1. Drugbank.ca/Etanercept
2. Genome.jp
